辣椒温和斑点病毒(PMMV)外壳蛋白基因的克隆和序列测定

黄粤* 马荣群 翟晓灵 岳文辉 潘忠强 李梅 崔健 李显日
青岛市农业科学研究院,青岛市农业生物技术重点实验室,青岛266100

通信作者:黄粤;E-mail: huangyuehy@sohu.com;Tel: 0532-7892652

摘 要:

从本院分离的辣椒温和斑点病毒株系PMMV-QD中提取RNA。根据已有报道的外壳蛋白(CP)自行设计引物P1、P2,用RT-PCR 扩增PMMV-QD 的 CP 基因的cDNA,插入pMD 18-T 载体,转化感受态受体菌XL1-Blue,以蓝白菌落筛选转化株,用PCR 检测白色菌落,确认获得了含cDNA 的阳性重组子。序列测定和比较的结果表明该片段确含有PMMV的CP 基因编码区,此种cDNA 与国外报道的PMMV 病毒株系核苷酸序列的同源性达到97.7%。

关键词:辣椒温和斑点病毒(PMMV); 外壳蛋白(CP)基因;cDNA;序列分析

收稿:2004-06-10   修定:2004-11-01

辣椒温和斑点病毒(PMMV)外壳蛋白基因的克隆和序列测定

黄粤* 马荣群 翟晓灵 岳文辉 潘忠强 李梅 崔健 李显日
青岛市农业科学研究院,青岛市农业生物技术重点实验室,青岛266100

Corresponding author: ; E-mail: huangyuehy@sohu.com; Tel: 0532-7892652

Abstract:

从本院分离的辣椒温和斑点病毒株系PMMV-QD中提取RNA。根据已有报道的外壳蛋白(CP)自行设计引物P1、P2,用RT-PCR 扩增PMMV-QD 的 CP 基因的cDNA,插入pMD 18-T 载体,转化感受态受体菌XL1-Blue,以蓝白菌落筛选转化株,用PCR 检测白色菌落,确认获得了含cDNA 的阳性重组子。序列测定和比较的结果表明该片段确含有PMMV的CP 基因编码区,此种cDNA 与国外报道的PMMV 病毒株系核苷酸序列的同源性达到97.7%。

Key words: 辣椒温和斑点病毒(PMMV); 外壳蛋白(CP)基因;cDNA;序列分析

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